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最近幾個月,隨著雞苗價格的攀升,許多孵化場為了追求效益,使雞苗質量下降,導致雛雞早期疾病多發,飼養前期弱雛淘汰率平均高達5%,給養殖戶造成了不小的損失。特別是早期的大腸桿菌和沙門氏菌病,治療效果并不理想。下面一起具體來了解一下:雛雞大腸桿菌病的診治 雛雞大腸桿菌的實驗室診斷。

雛雞大腸桿菌的實驗室診斷
1、材料與方法
1.1 材料
1.1.1 病料來源
病料來源為綏化市某縣市中隨機選出的三個雞場中疑似大腸桿菌感染的 7日齡雞群中分別各取出 10只進行臨床診斷和實驗室診斷。
1.1.2 培養基和試劑
主要培養基和試劑有麥康凱瓊脂、伊紅美藍瓊脂、革蘭染液,普通肉湯培養基、普通瓊脂培養基、三糖鐵瓊脂、藥敏片、葡萄糖、麥芽糖、甘露醇、乳糖、蔗糖、枸櫞酸鹽及各類生化反應試劑、大腸埃希菌O型抗血清。
1.1.3 儀器
主要儀器有顯微鏡、試管、培養皿、吸管等。
1.2 進行雛雞大腸桿菌實驗的方法
分別對三個雞舍的雞群總數、發病數和死亡數作出統計。無菌采集病死雞的心、肝、脾、肺、腎等組織,將病料觸片和血液涂片,分別進行革蘭染色和堿性美藍染色、鏡檢。對A、B、C三個樣病例進行細菌分離培養和血清型鑒定。從三個樣中隨機挑取兩個總共組成6個 (a、b、c、d、e、f)紫黑色帶有金屬光澤的菌落接種到斜面培養基上,37℃恒溫培養18~24h。觀察細菌生長及菌落特征。
1.2.1 動物回歸試驗
將分離純培養的 6個病原菌菌液頸部皮下接種 30 只 7 日齡雛雞,每只 0.2mL(約2×108cfu)。并設10只為對照組,每只頸部皮下注射0.2mL滅菌肉湯。隔離飼養,觀察1 星期。
1.2.2 藥敏試驗
將斜面培養基中增菌純培養的菌株培養液均勻涂布于普通瓊脂培養基表面,37℃干燥8min。然后用滅菌鑷子取 10種抗生素藥物紙片,將其分別對稱地貼在培養基表面,每個平皿貼4種,37℃恒溫培養18~20h后觀察結果。使用的 10種藥物為呋喃妥因、復方新諾明、慶大霉素、鏈霉素、青霉素、丙氟哌酸、頭孢他啶、利福平、磺胺嘧啶、新生霉素。還做了平板凝集試驗和生化試驗。
2. 結果與分析
2..1 鏡檢、血清型鑒定和生化試驗結果
病料涂片染色與病料接種培養后染色鏡檢,均檢測到革蘭陰性短桿菌。選擇攻毒試驗中對雞呈現高致病力的菌株 a、b、c、d、e與禽大腸桿菌 O型單因子血清分別進行平板凝集試驗,三個樣A、B、C的血清型鑒定鑒定結果都包含O1、O2、O78。A、B、C三個群體總共30只病例中,有 16只分離株是可以定型的,其中以 O1、O2、O78為主,這三種血清型在種類上占總量的 53.3%(16/30)因此,可以認為 O78、O1、O2 可能是綏化地區的優勢血清型。對分離的病原菌進行生化試驗,均能分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇及蔗糖,產酸產氣,初步判斷為大腸桿菌。
2..2 動物回歸試驗結果及分析
采用相同菌株攻毒,雞只死亡數量具體見表1。
3 討論

A、B、C 三家雞場都是同一時期引進的雞苗,出自同一雞苗生產公司,對三家的雞舍環境衛生以及飼養管理條件進行考察和比較來看,都存在通風不良的情況,且在對雞舍加溫時都采用了火爐方式,放雞苗時從管理人員那里得知雞舍內存在較重的煤氣;雞群發病期間末進行對癥治療,僅憑借經驗采用超高濃度的藥物飼喂雛雞。因此,三個雞場的發病情況和死亡率(分別是6.0%、5.2%與5.3%)情況基一致。
通過藥敏試驗可得出:可以采用對病原菌有高敏感性的抗生素對發病雞群進行治療;大腸桿菌的高敏感藥物減少,多為中低敏藥物并且產生耐藥菌株。這可能是平時飼養管理時,多用濫用抗生素和病情長時間不能得到控制從而使病原菌不斷的演化,對抗生素和一些藥物產生耐藥性。
從16株定型菌株的鑒定結果可以看出,O1、O2、O78等菌株出現的機率相對較高,且為優勢血清群,這與國內、外稱O1、O2、O35、O78為禽常見的致病性大腸桿菌血清型的結論一致。
本次針對三個養殖雞舍中雛雞大腸桿菌病的發病情況和飼養管理情況來看,一方面最主要原因可能是種蛋受到大腸桿菌的感染,另一方面加上轉移雛雞時雞舍的環境溫度和空氣凈化度控制不得當兩方面的原因導致雛雞大批發病死亡;并且在發病期間,相關養殖和技術人員并不清楚病因就僅憑借經驗,抗生素嚴重超標以及濫用抗生素,使得雛雞繼發中毒,從而造成更嚴重的死亡;并使得大腸桿菌不斷進化出更為耐藥的強毒株,通過藥敏試驗可以清晰的看到分離菌株已經對幾種藥物產生抗性,選擇高敏感的藥物,用藥2天后雛雞發病情況得到控制,用藥1星期后,病雞基本康復;這使得我們今后在用藥方面應該注意藥物的耐藥性問題以及對藥物的選擇性問題上具有指導意義。

雛雞大腸桿菌病的診治
1.流行病學調查
該場從外地某孵化場購入雛雞12000只,網上育雛。1日齡接種馬立克氏病疫苗,7日齡接種雞新城疫Ⅰ系弱毒疫苗。育雛舍用百毒殺消毒,飼喂自配混合飼料,并在飼料中拌入0.02%呋喃唑酮,0.1%高錳酸鉀飲水。10日齡時,雛雞開始發病,并出現死亡,至15日齡時,共發病4230只,死亡1458只,發病率為32.25 %,死亡率為12.15%。
2.臨床癥狀
病雛雞精神萎靡,食欲下降,飲欲增加,翅膀下垂,呆立,不愿走動,閉目昏睡,有的尖叫不安,臥地不起。排灰白色水樣便,泄殖腔污穢,沾滿糞便,有的泄殖腔紅腫外翻。有的死于臍炎。少數病雛雞還出現轉圈、扭頸等神經癥狀,最后衰竭而死。
3.病理變化
剖檢病雞30只,多數雞營養不良,消瘦。腹腔中積有半透明黃色液體。心包膜混濁增厚,心包積液增多。肝稍腫質脆,并有灰白色或黃白色壞死灶。肺淤血水腫,氣囊混濁。腸管內充滿氣體,腸上皮脫落,粘膜呈條片狀出血,腸內容物呈灰白色或黃白色水樣粘液,有的腸管與腹膜粘連在一起。卵黃膜薄而易碎,卵黃呈干酪樣或變為黃棕色水樣的殘留卵黃。
4.實驗室檢驗
4.1 涂片鏡檢
取病死雛雞肝、心血、脾、腎直接涂片,革蘭氏染色,鏡檢見兩端鈍圓、單個或成對排列的陰性短桿菌。
4.2 細菌培養
上述病料分別劃線接種于血液瓊脂平板和麥康凱平板,370C培養24h。血液瓊脂平板生長出圓形、隆起、光滑、濕潤、灰白色菌落,直徑約2.5~3.0mm;麥康凱平板,生長出圓形、光滑、隆起、大小均一的紅色菌落(中央顏色稍深)。
4.3 生化特性
利用分離培養菌落作生化試驗,結果該菌發酵葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇、產酸產氣,不發酵蔗糖,不產生H2S,不分解尿素,不液化明膠,吲哚試驗和M.R.試驗均為陽性,V.P.試驗陰性。
4.4 血清型鑒定
用0.5ml生理鹽水將上述分離到的2例細菌純培養物分別洗下,各置小試管內經水浴煮沸2h冷卻為待檢菌O抗原,按定性凝集試驗法,以標準大腸桿菌O群抗血清(中監所出品)同待檢菌O抗原作因子血清玻片凝集試驗,結果2株大腸桿菌均為致病性O78血清型。
4.5 動物試驗
將用滅菌生理鹽水輕洗下的麥康凱平板培養物1:10稀釋,腹腔接種于5只 健康小白鼠,0.2ml/只,結果在18~36h內全部死亡。取死亡小白鼠組織觸片染色鏡檢和劃線培養,分離到與接種菌完全一致的病原菌。
4.6 藥敏試驗
用上海生化試劑廠出品藥敏片,按常規紙片法進行藥敏試驗,結果該菌對慶大霉素、氯霉素、鏈霉素高敏;紅霉素、四環素、卡那霉素中敏;痢特靈、先鋒霉素5號、氨芐青霉素、青霉素G鈉低敏。
5.防治措施
5.1 將病雛雞隔離飼養,加強雛雞舍的通風、消毒,每日定時清除糞便,保持雛雞舍的干燥和清潔。
5.2 用氯霉素按0.08%混于飼料中,連喂7d,并用慶大霉素按3mg /kg體重飲水,連飲7d。同時,飼料中添加0.5%的維利素,并用維生素C按5..mg/L飲水。
采取以上綜合防治措施后,病雞數量減少,病情逐漸好轉。4天后,死亡停止,食欲增加,精神良好,恢復正常。
6.小結和討論
6.1 此次發病的原因可能與種雞場沒有及時淘汰O78 血清型大腸桿菌陽性種雞而造成垂直感染有關;孵化設備、種蛋的消毒不徹底,育雛期間沒有及時選擇高敏藥物進行連續預防,也是發病的一個原因。
6.2 本病在臨床癥狀上容易與巴氏桿菌病、沙門氏桿菌病混淆,須進行實驗室檢驗方可確診。應用藥物防治大腸桿菌,應作藥敏試驗,根據結果,用高敏藥物治療,才能取得好的療效。
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